淋巴细胞分化抗原检测 （淋巴细胞分化抗原检测）

检查前准备

• 向被检测者解释本操作的目的、方法等，消除顾虑；一般选取静脉血进行检测，采血前一天应清淡饮食、晚8点后避免进食和剧烈运动、避免饮酒以免影响结果，采血时避免情绪紧张。

操作方法

• 1.免疫组织化学染色法

• （1）免疫荧光显微技术：使荧光抗体与细胞表面的淋巴细胞分化抗原进行反应，洗涤除去游离的荧光抗体后，在荧光显微镜下观察。

• （2）免疫金银染色技术：利用胶体金标记淋巴细胞分化抗原对应的特异性抗体，通过免疫反应使胶体金颗粒沉积在抗原位置，加入银显影液，用对苯二酚将银离子还原成银原子，被还原的银原子沉积在胶体金颗粒周围形成“银壳”，最终在光镜下就能看到被放大的黑褐色物质。易于辨别阳性物质，而且能检测微量的抗原。

• 2.流式细胞术

• 利用荧光素标记的淋巴细胞分化抗原对应的单克隆抗体做分子探针，在流式细胞仪上检测淋巴细胞分化抗原的表达，计数淋巴细胞分化抗原阳性细胞的百分率。

临床意义

• 1.B淋巴细胞分化抗原

• （1）CD5：表达CD5的B细胞可以被各种激活B细胞的试剂激活，在脐带血、成人血和所有主要的外周淋巴样器官中都可以发现。

• （2）CD19：主要表达在B细胞上，在成熟的B细胞各个分化阶段上有表达，在定向B细胞的祖细胞上也有表达，但在滤泡树突状细胞上只有弱的表达，因此它是鉴别泛B细胞最好的表面抗原标志。

• （3）CD28：在B细胞系列中，浆细胞显著地表达CD28，在骨髓浆细胞和骨髓瘤细胞系中可以发现CD28。

• （4）CD20、CD79：与免疫球蛋白有关，只有产生免疫球蛋白的细胞表达这两种CD抗原，因而可用来区分B细胞和浆细胞的不同功能，CD20和CD79阳性时，患有B细胞性淋巴瘤的可能性大。

• 2.T淋巴细胞分化抗原

• （1）CD1：在所有胸腺皮质中的胸腺细胞都可以检测到CD1分子的表达，在激活的单核细胞和朗格汉斯细胞中也表达CD1。

• （2）CD2：在T细胞发育的早期阶段表达，由于抗CD2单克隆抗体可以激活早期T淋巴细胞祖细胞，因此CD2抗原可能出现在功能性T细胞受体表达之前，是胸腺细胞激活中可以利用的一种受体。

• （3）CD3：在早期胸腺细胞和成熟T细胞中表达，与T淋巴细胞密切联系，这种抗原经常在急性T淋巴细胞白血病中表达。

• （4）CD5：在所有的T细胞上都可以发现CD5抗原，它出现在T淋巴细胞个体发育的早期阶段，在外周血和脐带血中B细胞的一些细胞亚群上也可以检测到CD5的存在。

• （5）CD7：在T细胞个体发育的非常早期就会有所表达，但在T细胞成熟的最后阶段这一抗原会丢失，CD7的功能还不清楚，单核细胞和NK细胞也表达这种CD7抗原。

• （6）CD4和CD8：在抗原激活T细胞时，CD4和CD8作为一种共同的受体，CD4也是人类免疫缺陷病毒的受体。CD4阳性细胞数／CD8阳性细胞数比值降低见于艾滋病、恶性肿瘤等；CD4阳性细胞数／CD8阳性细胞数比值增高见于自身免疫性疾病、变态反应性疾病、器官移植排斥反应等。

• （7）CD25：这种抗原表达在激活的T、B淋巴细胞上。

• （8）CD28：表达在静止的T细胞上，CD28是环孢菌素抵抗的T细胞表面受体，与信号传导途径有关。

• （9）CD45：在所有的造血细胞中都有CD45的表达，缺乏CD45表达的T细胞对各种刺激都不会产生反应。