DSN,全称为duplex-specific nuclease,中文译名双链特异性核酸酶,是一种热稳定核酸酶,用于构建均一化cDNA。

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正文

DSN是一种热稳定核酸酶的缩写。该酶能够选择性降解双链 DNA 和 DNA-RNA 杂交体中的 DNA,但对单链核酸分子几乎没有作用,可以用于构建均一化cDNA。 Zhulidov et al首次把将 DSN 用于全长 cDNA 的均一化文库构建, 并成功地构建了美国加州海兔(Aplysiacalifornica)神经组织的均一化全长 cDNA 文库。

DSN 均一化法也是基于 DNA 复性动力学原理,通过控制 DNA 变性和复性(杂交)条件,利用特异降解双链 DNA 的酶 DSN,降解杂交过程中形成的双链 DNA。高丰度的基因形成双链的速度较快,所以降解也比较多,从而达到均一化的目的。 DSN 法简便,耗时短。利用本方法能够达到的均一化程度为:高丰度基因的丰度降低1~2 个数量级,中丰度的降低几倍或保持不变,低丰度的丰度增长不超过 3 倍。由于基于 DNA 复性动力学原理,不同组织来源的同源基因也可能被 DSN 酶降解,造成此类基因大幅度减少,这是基于DNA 复性动力学原理的均一化法不能克服的问题。同其他常用的均一化技术相比,基于 DSN 的均一化技术操作步骤简单, 所需要的起始材料也比较少, 具有较好的应用前景。